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柱层层析硅胶粉浅析硅胶柱层析的方式

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柱层层析硅胶粉浅析硅胶柱层析的方式

宣布日期:2017-06-04 作者: 点击:


柱层层析硅胶粉浅析硅胶柱层析的方式:


1.称量,200-300目硅胶,称30-70倍于上样量,若是极难分,也能够用100倍量的硅胶H.干硅胶的视密度在0.4摆布,以是要称40g硅胶,用烧杯量100ml也能够。

2.搅成匀浆,插手干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充实搅拌.若是洗脱剂是煤油醚/乙酸乙酯/丙酮系统,就用煤油醚拌,若是洗脱剂是氯仿/醇系统,就用氯仿拌.若是不能搅成匀浆,申明溶剂中含水量太大,特别是乙酸乙酯/丙酮,若是不与水配伍走分派色谱的话,必须事后用无水硫酸钠久置枯燥.氯仿用无水氯化钙枯燥,以撤除1%的醇.若是样品对酸敏感,不能用氯仿系统过柱。

3.装柱,将柱底用棉花塞紧,不用用海沙,插手约1/3体积煤油醚,氯仿,装上蓄液球翻开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内.跟着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内用煤油醚,氯仿,将其突入柱中。

4.压实,沉降实现后,插手更多的煤油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定.柱床约被紧缩至9/10体积.不管走常压柱或加压柱,都应停止这一步,能够使分手度进步良多,且能够防止过柱时因为柱床萎缩发生开裂。

5.上样,干法湿法都能够.海沙是没须要的.上样后,插手一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至靠近硅胶外表.而后就能够安心地插手大批洗脱剂,而不会冲坏硅胶外表。

6.过柱和搜集,柱层析现实上是在分散和分手之间的衡量.太低的洗脱强度并不好保举用梯度洗脱.搜集的例子,10mg上样量,1g硅胶H,0.5ml收一馏分,1-2g上样量,50g硅胶,200-300目,20-50ml收一馏分。

7.检测,要更多地操纵公用喷显剂,若是仅用紫外灯,会丧失较多产物,紫外的活络度普通比喷显剂底1-2个数目级。

8.送谱,搜集的产物旋干,在送谱前凡是须要重结晶.若是样品太少或为液体,可过一小凝胶柱,作为送谱前的最初纯化手腕.可撤除氢谱1.5ppm摆布所谓的"硅胶"峰。


明天柱层层析硅胶粉小编就讲到这,更多对于硅胶方面的常识请延续存眷维启化工。  


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